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一步法RT-qPCR试剂盒-SYBR Green I染料法

一步法试剂盒使逆转录和qPCR两种反应在同一管中进行,只需要加入模板RNA、特异性PCR引物和RNase-Free ddH2O即可。

试剂盒可以快速、高效的对病毒RNA或微量RNA进行定量分析

试剂盒使用独特的Foregene反转录试剂和Foregene HotStar Taq DNA Polymerase相结合,并配合独特的反应体系,有效提高反应的扩增效率和特异性。

优化的反应体系使得反应具有更高的检测灵敏性,更强的热稳定性,更好的耐受性。

RT-qPCR EasyTM (One Step)-SYBR Green I试剂盒附带有ROX内参染料,可用于消除信号本底及孔间信号误差,方便客户用于不同型号的定量PCR仪。

产 品 名 称

一步法RT-qPCR试剂盒-SYBR Green I

RT-qPCR EasyTM (One Step)-SYBR Green I

货    号

RT-02111

RT-02112

规    格

100 × 20 μL rxns

500 × 20 μL rxns

价    格

1,213.00

4,854.00

描    述独特的体系使得 RT Real Time PCR 反应有效的结合起来, 能快速的完成基因的定量检测。

产品介绍

RT-qPCR EasyTM (One Step)-SYBR Green I采用独特的体系使RTReal Time PCR反应有效的结合起来,能快速的完成基因的定量检测。该产品具有很强的耐受性,高特异性和稳定性。产品包含了本公司特有的Foregene HotStar Taq DNA Polymerase,该酶相对于普通Taq酶具有扩增速度快(2Kb/min)、扩增效率高、特异性扩增能力强、错配率低等优点。在此用于Real Time RT-PCR可减少非特异性扩增,提高PCR的准确性。


试剂盒应用

v 可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA进行分析

v 特别适合对高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板进行分析


储存条件

试剂盒避光保存于-20。产品收到后立即存放于-20恒温冰箱中。如果存储条件适当,产品在1年有效期内不会降低任何性能。


剂盒内容

2× RT-qPCR EasyTM Mix-SYBRForegene Reverse TranscriptaseRNase InhibitorForegene HotStar Taq DNAPolymerase、优化配比的dNTPsSYBR GreenIMg2+、稳定剂、增强剂、优化剂。

ROX Reference Dye一般用于ABIStratagene等公司的Real Time PCR扩增仪上,用于调整PCR加样误差所引起的 PCR管与管之间的差异。不同仪器所需ROX ReferenceDye浓度不同,用户可以根据仪器的推荐浓度添加。


Foregene Reverse Transcriptase

Foregene逆转录酶能够提供高效、特异性强的逆转录反应。逆转录酶表现出很高的亲和力,并在 50°C反应温度条件下仍然保持良好的逆转录活性,能够很好的逆转录其他逆转录酶不能处理的二级结构复杂的RNAForegene Reverse Transcriptase 灵敏度高,使用的RNA 量范围广泛(0.1pg≤RNA≤1μg)


Foregene HotStar Taq DNA Polymerase

提供了PCR的高度特异性扩增。反转录进行时,DNA聚合酶是完全无效的,不妨碍反转录反应。后通过PCR反应程序,加热到94°C,激活DNA聚合酶同时,失活逆转录酶。热启动过程消除了第一个循环时非特异性退火的引物和引物二聚体的形成,保证PCR扩增的高度特异性和可靠性。


RNA模板浓度

(0.1pg-100ng total RNA)/20μL 体系

  • 定量值重复性差

    Answer

    1.     仪器故障。

    建议:PCR仪的每一个PCR孔之间可能存在误差,在温度管理或检测时产生重现性较差现象。请根据相应仪器的说明书进行检测。

    2.     样品纯度不好。

    建议:样品不纯会导致实验的重复性较差,这包括模板、引物的纯度。最好进行模板的再纯化,引物最好使用SDS-PAGE纯化。

    3.     PCR体系配制放置时间过长。

    建议:RT-qPCR体系配制好后立即用于PCR实验,不要搁置太长时间;建议先设置到PCR程序后再进行RT-qPCR体系配制。

    4.     PCR扩增条件不适合、引物序列或者浓度不当。

    建议:确认引物序列的正确性以及引物没有降解;扩增信号不好时,可尝试调整退火温度,适当调整引物浓度等。


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