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第一链cDNA合成预混体系Master Premix(For qPCR)

高效的逆转录体系,只需20min即可完成第一链cDNA的合成。

高灵敏的逆转录体系,pg级别的模板也可以得到高质量的cDNA。

逆转录体系热稳定性高,该体系反应温度可高达50℃,具有良好的逆转录性能。

即使不纯的RNA样品(酒精可达60%,胍盐可达750mM)也可进行逆转录反应。

2× RT OR-EasyTM Mix已添加了优化配比的逆转录引物(Random Primer、Oligo(dT)18 Primer)。

产 品 名 称

第一链cDNA合成预混体系Master Premix(For qPCR)

RT EasyTM II

货    号

RT-01022

RT-01023

规    格

200 × 10 μL rxns

800  × 10 μL rxns

价    格

¥628.00

2,371.00

描    述

本产品是专门为Real Time PCR研制的快速去除基因组DNA污染的逆转录体系。

本产品是专门为Real Time PCR研制的逆转录体系,预混优化配比的反转录引物(Oligo(dT)引物和随机引物),无需单独添加。

产品介绍

本公司的2× RT OR-EasyTM Mix合成第一链cDNA的温度高达50,有利于复杂二级结构RNA模板进行逆转录反应。

实验室纯化获得的RNA常有酒精及胍盐残留,对大多数逆转录酶有很强的抑制性,导致逆转录效果不理想或逆转录效率低。福际2× RT Mix对酒精和胍盐显示出极高的耐受性,RNA样品中酒精的最高耐受为60%胍盐的最高耐受为750mM。即使不纯的RNA也可用福际2× RT OR-EasyTM Mix进行逆转录反应。

2×RT OR-EasyTM Mix是专为Real Time PCR而研发的快速逆转录试剂,该体系逆转录效率高,无需添加任何引物,可对少量RNA模板进行良好的逆转录反应。独特的反应体系,使得RT反应更加简便、快捷、高效,20min即可完成第一链cDNA合成。此产品可与Foregene公司的荧光定量产品Real Time PCR EasyTM 配合使用,能获得高质量的实验结果。


试剂盒应用

v 直接用于RealTime PCR定量分析基因的表达

v 可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA进行分析

v GC含量或具有复杂二级结构RNA模板的逆转录


储存条件

试剂盒保存于-20。产品收到后立即存放于-20恒温冰箱中。如果存储条件适当,产品在1年有效期内不会降低任何性能。



剂盒内容

2× RT OR-EasyTM MixForegene Reverse TranscriptaseRNase InhibitordNTPs、稳定剂、增强剂、优化剂及优化配比的逆转录引物(Random PrimerOligo(dT)18 Primer)


Foregene Reverse Transcriptase

Foregene逆转录酶能够提供高效、特异性强的逆转录反应。逆转录酶表现出很高的亲和力,并在 50°C反应温度条件下仍然保持良好的逆转录活性,能够很好的逆转录其他逆转录酶不能处理的二级结构复杂的RNAForegene Reverse Transcriptase 灵敏度高,使用的RNA 量范围广泛(0.1pg≤RNA≤1μg)


RT Mix受性

经测试分析,2× RT OR-EasyTM Mix对酒精和胍盐显示出极高的耐受性。实验室纯化获得的RNA常有酒精及胍盐残留,对逆转录有很强的抑制性,导致逆转录效果不理想或逆转录效率低。Foregene RT Easy系列产品对酒精及胍盐的耐受能力使得逆转录更容易、高效率的进行

酒精耐受性分析


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胍盐耐受性分析


12

RNA模板浓度

(0.1pg-0.5μg totalRNA or 0.01pg-0.05μg mRNA) /10 μL体系



  • 说明书

  • 产品文献

    Association between inflammatory-response gene polymorphisms and risk of acute kidney injury in children Jing He, Guoyan Xie, Hui Wu, Song Xu, Jun Xie, Youyuan Chen, Xinqian Zhao

    贵州省毕节第一人民医院儿科

    Bioscience Reports ( IF 2.899 ) Pub Date : 2018-12 , DOI: 10.1042/BSR20180537

    文章链接:http://www.bioscirep.org/content/38/6/BSR20180537

  • MSDS

  • COA

  • 非特异性扩增

    Answer

    1.    引物设计不合理

    建议:按照引物设计原则进行引物的设计。

    2.    基因组残留。

    建议:使用含有基因组去除的逆转录试剂盒如(Cat.No.RH-01031)或者设计跨内含子引物。


  • RT-QPCR无扩增信号

    Answer

    1.     RNA被降解。

    建议:提取RNA的材料尽量新鲜,应用高质量高纯的的RNA

    2.    RNA含有抑制剂。

    建议:逆转录抑制剂一般包括SDS、胍盐、EDTA等,建议通过70%的乙醇对RNA沉淀进行清洗,除去抑制剂。

    3.    引物设计问题。

    建议:按照引物设计原则,重新设计引物进行检查。


  • 空白对照出现目的条带

    Answer

    1.    操作工具或试剂污染。

    建议:实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔,防止将DNA样品吸入加样枪内或溅出离心管外。

    2.    PCR反应体系制备时发生污染。

    建议:操作时进行必要的防护措施,比如:戴乳胶手套,使用带滤芯的枪头。使用防污染体系的real time PCR Mix

    3.    引物出现降解。

    建议:使用SDS-PAGE电泳检测引物是否发生降解,更换新的引物进行荧光检测实验。


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COA