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去基因组LncRNA专用第一链cDNA合成预混体系Super Premix(For LncRNA)

高效的去gDNA能力,能在2min内去除模板中的gDNA。

对lncRNA能高效逆转录,逆转录产物进行qPCR时,比常规逆转录体系Ct值低。

高效的逆转录体系,只需15min即可完成第一链cDNA的合成。

复杂模板:GC含量较高和二级结构复杂模板亦能得到很高效率的逆转。

高灵敏的逆转录体系,pg级别的模板也可以得到高质量的cDNA。

逆转录体系热稳定性高,最适反应温度为42℃,在50℃仍具有良好的逆转录性能。

产 品 名 称

去基因组LncRNA专用第一链cDNA合成预混体系

Lnc-RT HeroTM I(With gDNase)

货    号

RTL-09098

RTL-09099

规    格

25 × 20 μL rxns

50  × 20 μL rxns

价    格

949.00

1,522.00

描    述

本产品是专门为LncRNA研制的快速去除基因组DNA污染的逆转录体系。

5× gDNase Mix能在42°C,2min快速去除RNA中残留的基因组,有效的避免了基因组对qPCR结果的干扰。

产品介绍

Lnc-RT HeroTM I(With gDNase)是专门为lncRNA研制的快速去除基因组DNA污染的逆转录体系。5× gDNase Mix能在42°C2min快速去除RNA中残留的基因组,有效的避免了基因组对qPCR结果的干扰。

5× L-RT HeroTM Mix内含福际专门研制的Foregene LncRNA Reverse Transcriptase是一款专门针对lncRNA等长RNA复杂模板的新型反转录酶,具有更强的RNA亲和性和更高的逆转录效率。优化后的体系使得逆转录速率更快,能轻松的转录GC含量高、二级结构复杂的RNA模板,42°C15min即可完成第一链cDNA的合成。


试剂盒应用

v lncRNA 相对定量分析

v lncRNA绝对定量分析

v 可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA进行分析

v GC含量或具有复杂二级结构RNA模板的逆转录


储存条件

试剂盒保存于-20。产品收到后立即存放于-20恒温冰箱中。如果存储条件适当,产品在1年有效期内不会降低任何性能。


试剂盒内容

5× gDNase MixgDNA去除剂,在进行RT反应前务必按照操作说明使用该试剂(内部甘油含量较高,-20以上可能不会结冰,属于正常现象)

5× L-RT HeroTM Mix包含福际生物专门研制的Foregene LncRNA Reverse TranscriptaseRNase InhibitordNTPs、稳定剂、增强剂、优化剂及优化配比的逆转录引物(Random PrimerOligo(dT)18 Primer)


Foregene Reverse Transcriptase

Foregene LncRNA逆转录酶能够提供高效、特异性强的逆转录反应。逆转录酶表现出很高的亲和力,并在 50°C反应温度条件下仍然保持良好的逆转录活性,能够很好的逆转录其他逆转录酶不能处理的二级结构复杂的RNAForegene ReverseTranscriptase 灵敏度高,使用的RNA 量范围广泛(0.1pg≤RNA≤1μg)


RNA模板浓度

v For lncRNA10ng-1μg total RNA/20μL体系。

v For general RNA0.1pg-1μg total RNA or 0.01pg-0.1μg mRNA/20μL体系

  • 非特异性扩增非特异性扩增

    Answer

    1.    引物设计不合理

    建议:按照引物设计原则进行引物的设计。

    2.    基因组残留。

    建议:确定第一步gDNA去除反应温度为42°C,也可延长反应时间至5min


  • RT-QPCR无扩增信号

    Answer

    1.     RNA被降解。

    建议:提取RNA的材料尽量新鲜,应用高质量高纯的的RNA

    2.    RNA含有抑制剂。

    建议:逆转录抑制剂一般包括SDS、胍盐、EDTA等,建议通过70%的乙醇对RNA沉淀进行清洗,除去抑制剂。

    3.    引物设计问题。

    建议:按照引物设计原则,重新设计引物进行检查。


  • 空白对照出现目的条带

    Answer

    1.    操作工具或试剂污染。

    建议:实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔,防止将DNA样品吸入加样枪内或溅出离心管外。

    2.    PCR反应体系制备时发生污染。

    建议:操作时进行必要的防护措施,比如:戴乳胶手套,使用带滤芯的枪头。使用防污染体系的Real Time PCR Mix

    3.    引物出现降解。

    建议:使用SDS-PAGE电泳检测引物是否发生降解,更换新的引物进行荧光检测实验。


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