产 品 名 称 | 去基因组第一链cDNA合成预混体系Master Premix(For qPCR) RT EasyTM II(With gDNase) | ||
货 号 | RT-01031 | RT-01032 | |
规 格 | 25 × 20 μL rxns | 100 × 20 μL rxns | |
价 格 | ￥440.00 | ￥1,323.00 | |
| 描 述 | 本产品是专门为Real Time PCR研制的快速去除基因组DNA污染的逆转录体系。 5× gDNase Mix能在42°C，2min快速去除RNA中残留的基因组，有效的避免了基因组对qPCR结果的干扰。 | ||
产品介绍
RT EasyTM II(With gDNase)是专门为Real Time PCR研制的快速去除基因组DNA污染的逆转录体系。5×gDNase Mix能在42°C，2min快速去除RNA中残留的基因组，有效的避免了基因组对qPCR结果的干扰。
5× RO-EasyTM Mix内含福际专门研制的Foregene Reverse Transcriptase，是一款新型反转录酶，具有更强的RNA亲和性。优化后的体系使得逆转录速率更快，42°C，15min即可完成第一链cDNA的合成。
该试剂盒的逆转录体系在50°C条件下逆转录酶也能保持良好的活性，因此对于复杂的RNA模板更优势，能轻松的转录GC含量高、二级结构复杂的RNA模板。
试剂盒应用
v 直接用于RealTime PCR定量分析基因的表达。
v 可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA进行分析。
v 高GC含量或具有复杂二级结构RNA模板的逆转录。
储存条件
试剂盒保存于-20℃。产品收到后立即存放于-20℃恒温冰箱中。如果存储条件适当，产品在1年有效期内不会降低任何性能。
剂盒内容
5× gDNase Mix：gDNA去除剂，在进行RT反应前务必按照操作说明使用该试剂(内部甘油含量较高，-20℃以上可能不会结冰，属于正常现象)。
5× RO-EasyTM Mix：包含福际生物专门研制的Foregene Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、dNTPs、稳定剂、增强剂、优化剂及优化配比的逆转录引物(Random Primer、Oligo(dT)18 Primer)。
Foregene Reverse Transcriptase
Foregene逆转录酶能够提供高效、特异性强的逆转录反应。逆转录酶表现出很高的亲和力，并在 50°C反应温度条件下仍然保持良好的逆转录活性，能够很好的逆转录其他逆转录酶不能处理的二级结构复杂的RNA。Foregene Reverse Transcriptase 灵敏度高，使用的RNA 量范围广泛(0.1pg≤RNA≤1μg) 。
RT Mix耐受性
经测试分析，2× RT OR-EasyTM Mix对酒精和胍盐显示出极高的耐受性。实验室纯化获得的RNA常有酒精及胍盐残留，对逆转录有很强的抑制性，导致逆转录效果不理想或逆转录效率低。Foregene RT Easy系列产品对酒精及胍盐的耐受能力使得逆转录更容易、高效率的进行。
酒精耐受性分析
胍盐耐受性分析
RNA模板浓度
(0.1pg-1μg total RNAor 0.01pg-0.1μg mRNA) /20 μL体系。
说明书
产品文献
Association between inflammatory-response gene polymorphisms and risk of acute kidney injury in children Jing He, Guoyan Xie, Hui Wu, Song Xu, Jun Xie, Youyuan Chen, Xinqian Zhao
贵州省毕节第一人民医院儿科
Bioscience Reports ( IF 2.899 ) Pub Date : 2018-12 , DOI: 10.1042/BSR20180537
文章链接：http://www.bioscirep.org/content/38/6/BSR20180537
MSDS
COA
非特异性扩增
Answer
1. 引物设计不合理
建议：按照引物设计原则进行引物的设计。
2. 基因组残留。
建议：确定第一步gDNA去除反应温度为42°C，也可延长反应时间至5min。
RT-QPCR无扩增信号
Answer
1. RNA被降解。
建议：提取RNA的材料尽量新鲜，应用高质量高纯的的RNA。
2. RNA含有抑制剂。
建议：逆转录抑制剂一般包括SDS、胍盐、EDTA等，建议通过70%的乙醇对RNA沉淀进行清洗，除去抑制剂。
3. 引物设计问题。
建议：按照引物设计原则，重新设计引物进行检查。
空白对照出现目的条带
Answer
1. 操作工具或试剂污染。
建议：实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔，防止将DNA样品吸入加样枪内或溅出离心管外。
2. PCR反应体系制备时发生污染。
建议：操作时进行必要的防护措施，比如：戴乳胶手套，使用带滤芯的枪头。使用防污染体系的real time PCR Mix。
3. 引物出现降解。
建议：使用SDS-PAGE电泳检测引物是否发生降解，更换新的引物进行荧光检测实验。
