产 品 名 称 | 第一链cDNA合成预混体系Master Premix RT EasyTM I | ||
货 号 | RT-01011 | RT-01012 | |
规 格 | 25 × 20 μL rxns | 100 × 20 μL rxns | |
价 格 | ￥424.00 | ￥1,456.00 | |
| 描 述 | 便捷的逆转录预混体系Master Premix，逆转录产物适用于克隆全长cDNA，qPCR等。 | ||
产品介绍
本公司的2× RT EasyTM Mix合成第一链cDNA的温度高达50℃，有利于复杂二级结构RNA模板进行逆转录反应。
实验室纯化获得的RNA常有酒精及胍盐残留，对大多数逆转录酶有很强的抑制性，导致逆转录效果不理想或逆转录效率低。福际2× RT EasyTM Mix对酒精和胍盐显示出极高的耐受性，对RNA样品中酒精的最高耐受为45%，胍盐的最高耐受为750mM。即使不纯的RNA也可用福际2× RT Mix进行逆转录反应。独特的反应体系,使得RT反应更加简便、快捷、高效，25min即可完成第一链cDNA的合成。
此产品可与Foregene公司的荧光定量产品Real Time PCR EasyTM 配合使用，能获得高质量的实验结果。
试剂盒应用
v 常规RT-PCR。
v 合成cDNA，用于克隆和表达研究。
v 转录起始位点的引物延伸法分析。
v RACE(cDNA末端快速扩增)。
v 线性RNA扩增。
v 芯片标记。
储存条件
试剂盒保存于-20℃。产品收到后立即存放于-20℃恒温冰箱中。如果存储条件适当，产品在1年有效期内不会降低任何性能。
剂盒内容
2× RT EasyTM Mix：Foregene Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、dNTPs、反应缓冲液、优化剂和稳定剂等。
Random Primer (50μM)：6个寡聚核苷酸的随机引物，其浓度为50μM。
Oligo(dT)18 Primer (50μM)：具有18个dT的引物，其浓度为50μM。
Foregene Reverse Transcriptase
Foregene逆转录酶能够提供高效、特异性强的逆转录反应。逆转录酶表现出很高的亲和力，并在 50°C反应温度条件下仍然保持良好的逆转录活性，能够很好的逆转录其他逆转录酶不能处理的二级结构复杂的RNA。Foregene Reverse Transcriptase 灵敏度高，使用的RNA 量范围广泛(0.1pg≤RNA≤1μg) 。
RT Mix耐受性
经测试分析，2× RT EasyTM Mix对酒精和胍盐显示出极高的耐受性。实验室纯化获得的RNA常有酒精及胍盐残留，对逆转录有很强的抑制性，导致逆转录效果不理想或逆转录效率低。Foregene RT Easy系列产品对酒精及胍盐的耐受能力使得逆转录更容易、高效率的进行。
酒精耐受性分析
胍盐耐受性分析
RNA模板浓度
(0.1pg-5μg total RNAor 0.01pg-0.5μg mRNA) /20 μL体系。
说明书
产品文献
MiR-610 functions as a tumor suppressor in oral squamous cell carcinoma by directlytargeting AGK
L.-X. YAO, J. LIU, L. XU
山东省聊城市人民医院口腔外科
European Review for Medical and Pharmacological Sciences ( IF 2.387 ) Pub Date : 2019, DOI：10.26355/eurrev_201901_16764
文章链接：https://www.europeanreview.org/wp/wp-content/uploads/187-197.pdf
MSDS
COA
非特异性扩增
Answer
1. 引物设计不合理
建议：按照引物设计原则进行引物的设计。
2. 基因组残留。
建议：使用含有基因组去除的逆转录试剂盒如(Cat.No.RH-01031)或者设计跨内含子引物。
RT-QPCR无扩增信号
Answer
1. RNA被降解。
建议：提取RNA的材料尽量新鲜，应用高质量高纯的的RNA。
2. RNA含有抑制剂。
建议：逆转录抑制剂一般包括SDS、胍盐、EDTA等，建议通过70%的乙醇对RNA沉淀进行清洗，除去抑制剂。
3. 引物设计问题。
建议：按照引物设计原则，重新设计引物进行检查。
空白对照出现目的条带
Answer
1. 操作工具或试剂污染。
建议：实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔，防止将DNA样品吸入加样枪内或溅出离心管外。
2. PCR反应体系制备时发生污染。
建议：操作时进行必要的防护措施，比如：戴乳胶手套，使用带滤芯的枪头。使用防污染体系的real time PCR Mix。
3. 引物出现降解。
建议：使用SDS-PAGE电泳检测引物是否发生降解，更换新的引物进行荧光检测实验。
本产品是专门为Real Time PCR研制的快速去除基因组DNA污染的逆转录体系。5× gDNase Mix能在42°C，2min快速去除RNA中残留的基因组，有效的避免了基因组对qPCR结果的干扰。
本产品是专门为Real Time PCR研制的逆转录体系，预混优化配比的反转录引物（Oligo(dT)引物和随机引物），无需单独添加。
热启动Foregene Taq Polymerase，具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性;同时还包含蓝色指示剂，便于移液示踪，有效减少移液错误。
