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病毒RNA提取试剂盒

全程常温(15-25°C)操作,无需冰浴和低温离心。

整套试剂盒RNase-Free,无需担心RNA降解。

RNA得率高:RNA-Only Column和独特配方搭配能高效的纯化RNA。

速度快:操作简便,可在30分钟内完成。

安 全:无需有机试剂抽提。

质量高:提取得到的病毒RNA纯度高,没有蛋白和其它杂质污染,能够满足下游各种实验应用。

产 品 名 称

病毒RNA提取试剂盒

Viral RNA Isolation Kit

货    号

RE-02011

RE-02014

规    格

50T

200T

价    格

¥905.00

¥3,054.00

描    述

快速从血浆、血清、无细胞体液和细胞培养上清液等样品中高效率分离纯化病毒的RNA

试剂盒包含Foregene纯化柱及试剂。

产品介绍

该试剂盒采用本公司研制的离心柱和配方,可以从口腔拭子、血浆、血清、无细胞体液和细胞培养上清液等样品中高效率分离纯化病毒的RNA。试剂盒特别加入了Linear Acrylamide,可以从体系中轻松捕获微量RNA,具有方便快捷、产量高、重复性好的特点。RNA-Only Column能高效的结合RNA,搭配独特的配方,可以同时处理大量样品。

全体系RNase-Free,使得纯化得到的病毒RNA无降解;Buffer viRW1Buffer viRW2缓冲液洗涤体系,使得获得的病毒RNA无蛋白、核酸酶或其它杂质的污染,可直接用于下游分子生物学实验。


试剂盒应用

该试适用于血浆、血清、无细胞体液和细胞培养上清液等样品中病毒RNA提取纯化


纯化RNA的应用

病毒RNA提取试剂盒纯化得到的病毒RNA可用于各种下游分子实验,例如: RT-PCRReal Time PCRNorthern Blot、芯片分析、分子克隆等。


RNA提取得率和纯度

使用病毒RNA提取试剂盒可以从口腔拭子、血浆、血清、无细胞体液和细胞培养上清液等样品中纯化得到的病毒RNA,其产量与样本本身、样本初始量、样本新鲜程度、样本保存时间以及操作相关。纯化得到的RNA,其OD260/280=1.8-2.1


储存条件

常温(15–25℃),有效期为 24个月。


试剂盒内容

Linear Acrylamide:降低纯化柱的本底吸附,轻松捕获体系中的微量RNA

Buffer viRL:提供样本裂解所需的环境以及过柱环境。

Buffer viRW1:去除RNA中的蛋白质、DNA等杂质。

Buffer viRW2:去除RNA中残留的盐离子。

RNase-Free ddH2O:洗脱纯化柱膜上的病毒RNA

RNA-only Column:特异吸附RNA片段


产品信息

型号

离心柱型

纯化组件

Foregene离心柱、试剂

通量

1-24个样品

制备时间

~30 min (24个样品)

离心机

台式离心机

离心柱液体盛装量

800 μL

纯化柱RNA承载量

20 μg

单次样本处理量

≤200 μL

洗脱体积

30-50 μL

组织样本处理量

≥80%回收效率


操作流程

病毒RNA提取






  • 提取不到RNA或者RNA产量低

    Answer

    通常会有多种因素影响回收效率,比如:样本RNA含量、操作方法、洗脱体积等。

    常见原因分析:

    1.   操作过程中进行了冰浴或低温(4°C)离心。

    建议:全程常温(15-25°C)操作,切勿冰浴和低温离心。

    2.   样品保存不当或样本保存时间过久。

    建议:样本保存于-80或冻存于液氮中,并避免反复冻融使用;尽量采用新鲜采集样品进行RNA提取操作。  

    3.   样品裂解不充分。

    建议:请保证样品和Linear Acrylamide工作液彻底混匀,并且在室温(15-25)孵育10min

    4.   洗脱液添加不正确。

    建议:确认RNase-Free ddH2O滴加到了纯化柱膜中间位置。

    5.   Buffer viRW2中没有添加正确体积的无水乙醇。

    建议:请按照说明书,在试剂盒使用前,Buffer viRW2中添加正确体积的无水乙醇并混匀。

    6.   样品用量不合适。

    建议:每500μl BufferviRL处理样品量200µl,样品处理量过多会导致RNA提取量降低。

    7.   洗脱体积不合适或洗脱不彻底。

    建议:纯化柱的洗脱液体积为30-50μl;若洗脱效果并不理想,建议在加入预热的RNase-Free ddH2O后,延长室温放置的时间,例如放置5-10min

    8.   纯化柱在Buffer viRW2洗涤之后有乙醇残留。

    建议:如果在Buffer viRW2洗涤,空管离心2min后还有乙醇残留,可以在空管离心后将纯化柱置于室温5min,以充分除去残留乙醇。


  • 纯化获得的RNA有降解

    Answer

    纯化得到的RNA的质量和样品的保存、RNase污染、操作等因素有关。

    常见原因分析:

    1.   采集样品没有及时保存。

    建议:样品在采集后若不及时使用,请立即低温保存于-80或者液氮中。提取RNA请尽量使用新近采集的样品。

    2.   采集样品反复冻融。

    建议:采集样品保存过程中要避免冻融(不超过一次),否则会导致核酸得率降低。

    3.   操作间有RNase引入或没有佩戴一次性手套、口罩等。

    建议:RNA提取实验最好在单独的RNA操作间进行,并在实验前清理好实验桌,实验时佩戴一次性手套、口罩,最大程度上避免RNase引入导致的RNA降解。

    4.   试剂在使用过程中被RNase污染。

    建议:更换新的Viral RNA Isolation Kit进行相关实验。

    5.   RNA操作时所用的离心管、枪头等有RNase污染。

    建议:确认RNA提取时所用到的离心管、枪头、移液器等都是RNase-Free


  • 纯化获得的RNA影响下游实验

    Answer

    经纯化柱纯化的RNA,如果盐离子、蛋白质含量过多会影响下游实验,比如:逆转录、Northern Blot等。

    1.   洗脱后的RNA有盐离子残留。

    建议:确认Buffer viRW2中添加了正确体积的无水乙醇,并按操作说明的离心转速进行2次纯化柱洗涤;如果还有盐离子残留,可在纯化柱加入Buffer viRW2后,室温放置5min,再进行离心操作,以最大程度上去除盐离子污染。

    2.   洗脱后的RNA有乙醇残留。

    建议:确认Buffer viRW2洗涤后,按操作说明的离心转速进行空管离心操作;如果还有乙醇残留,可以在空管离心后再室温放置5min,以最大程度上去除乙醇残留。


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