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植物基因组DNA提取试剂盒

无RNA酶污染:试剂盒提供的DNA-Only Column使得实验过程中无需额外添加RNA酶即可去除基因组DNA中的RNA,避免实验室遭受外源RNA酶污染。

速度快:Foregene Protease具有比同类蛋白酶更高的活性,消化组织样本速度快;操作简单,基因组DNA提取操作在30分钟内即可完成。

方 便:离心操作均在常温,无需4℃低温离心或乙醇沉淀DNA。

安 全:无需有机试剂抽提。

质量高:提取获得的基因组DNA片段大、无RNA、无RNA酶、离子含量极低,能满足各种实验的要求。

产 品 名 称

植物基因组DNA提取试剂盒

Plant DNA Isolation Kit

货     号

DE-06111

规    格

50T

价    格

¥436.00

描    述

快速从植物样本(包括多糖多酚植物样本)中纯化获得高质量的基因组DNA

产品介绍

本试剂盒采用可以特异性结合DNADNA-Only Column全新的Foregene Protease以及独特的缓冲体系,大大简化了植物基因组DNA提取步骤,在30分钟内可获得高纯度基因组DNA,极大程度上避免了基因组DNA的降解。

离心柱中的DNA-Only硅胶膜可高效、特异吸附DNA,无需添加任何有机试剂即可最大限度的去除RNA、杂质蛋白、离子及多糖、多酚等有机化合物。获得的DNA片段大,纯度高、质量稳定可靠


试剂盒应用

该试剂盒适用于新鲜或冻存的植物组织基因组DNA提取纯化


纯化DNA的应用

植物基因组DNA提取试剂盒纯化获得的基因组DNA纯度高,可用于常规分子生物学操作,如:酶切、PCRSouthern杂交、文库构建等实验。


DNA提取得率和纯度

提取获得的植物基因组DNA量与植物样本的来源、样本的新鲜程度、保存条件、水分含量等因素相关。使用PlantDNA Isolation Kit处理各种来源植物新鲜叶片样本,获得的基因组DNA量和纯度见下表

新鲜幼嫩叶片

样本用量(mg)

DNA产量(μg)

OD260/280

玉米

100

4-7

1.7-1.9

大豆

100

5-7

1.7-1.9

小麦

100

10-14

1.7-1.9

棉花

100

3-5

1.7-1.9

水稻

100

4-6

1.7-1.9

烟草

100

5-7

1.7-1.9

油菜

100

2-3

1.7-1.9

注意:此表数据仅作参考,实际操作中由于所用材料的存储条件、操作熟练度等因素影响,所得数据会与此表数据有些许出入。


试剂盒内容

Buffer PL1:提供植物组织裂解环境。

Foregene Protease:在Buffer PL1的环境下酶解植物组织中的蛋白质。

Buffer PL2:失活Foregene Protease,并提供DNA上柱环境。

Buffer PW:去除DNA中的蛋白质、RNA等杂质。

Buffer WB:去除DNA中的残留的盐离子。

Buffer EB:洗脱纯化柱膜上的DNA

DNA-only Column:特异吸附裂解产物中的基因组DNA


产品信息

型号

离心柱型

纯化组件

Foregene离心柱、试剂

通量

1-24个样品

制备时间

~30 min (24个样品)

离心机

台式离心机

样本酶解物分离

离心分离

离心柱液体盛装量

800 μL

纯化柱DNA承载量

80 μg

洗脱体积

100-200 μL

植物样本处理量

100 mg


操作流程

植物DNA提取


  • 说明书

  • 产品文献

    A simple and cost-effective method for screening of CRISPR/Cas9-induced homozygous/biallelic mutants
    Jinggong Guo, Kun Li, Lifeng Jin, Rui Xu, Kaiting Miao, Fengbo Yang,Chaoya Qi, Lin Zhang, Jose R.Botella, Ran Wang, Yuchen Miao
    河南大学植物胁迫生物学研究所生物系棉花生物学国家重点实验室
    Plant Methods ( IF 4.269 ) Pub Date : 2018-05-29, DOI:10.1186/s13007-018-0305-8
    文章链接:https://plantmethods.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13007-018-0305-8

    DNA barcoding analysis and phylogenetic relationships of tree species in tropical cloud forests
    Yong Kang, Zhiyan Deng, Runguo Zang & Wenxing Long
    海南热带生物资源可持续利用重点实验室Scientific Reports ( IF 4.259 ) Pub Date : 2017-10-02, DOI:10.1038/s41598-017-13057-0
    文章链接:https://www.nature.com/articles/s41598-017-13057-0

    Complete Chloroplast Genome Sequence of Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg and Evolution Analysis within the Malvales Order
    Ying Wang, Di-Feng Zhan, Xian Jia, Wen-Li Mei, Hao-Fu Dai, Xiong-Ting Chen* and Shi-Qing Peng

    中国热带农业科学院热带生物科学与生物技术研究所
    农业部热带作物生物学与遗传资源重点实验室

    Frontiers in Plant Science ( IF 4.495 ) Pub Date : 2016-03-08, DOI:10.3389/fpls.2016.00280
    文章链接:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4781844/

  • MSDS

  • COA

  • 提取过程中无法获得基因组DNA

    Answer

    通常有多种因素会影响基因组DNA产量,包括样本来源、样本新老程度、样本保存条件、操作等。

    1.    组织样本保存不当或保存时间太长,导致基因组DNA已经降解。

    建议:组织样本保存于液氮或者-20;尽量使用新近采集样本进行基因组DNA的提取。

    2.    样本用量过少可能导致提取不到相应的基因组DNA

    建议:对于保存时间很长或基因组DNA降解比较厉害的组织样本,可以适当增加组织样本的用量,以便提取获得可观的基因组DNA。可以根据DNA需要确定样本的用量,但是新鲜样本不宜超过100mg,干燥样本不宜超过30mg

    3.    样本没有进行液氮研磨或液氮之后放置时间过长。

    建议:在进行DNA提取时,样本需进行液氮充分研磨以破碎细胞壁;研磨完成后请尽快将样本粉末转移至65预热的Buffer PL1(一旦研磨的粉末融化,基因组DNA便开始快速降解)

    4.    Foregene Protease保存不当,导致其活性降低或失活。

    建议:确认Foregene Protease保存条件或者更换新的Foregene Protease进行酶解反应。

    5.    试剂盒保存不当或存放时间太长,导致试剂盒里面某些组分失效。

    建议:购置新的植物基因组DNA提取试剂盒进行相关操作。

    6.    试剂盒使用不当。

    建议:购置样本专用的植物基因组DNA提取试剂盒(Plant DNA Isolation Kit)进行植物基因组DNA的提取纯化。

    7.    Buffer WB没有添加无水乙醇。

    建议:确认Buffer WB中添加正确体积的无水乙醇。

    8.    洗脱液没有正确滴加到硅胶膜上。

    建议:将65预热的洗脱液滴加到硅胶膜的正中间,并在室温放置5分钟增加洗脱效率。


  • 提取获得低产量基因组DNA

    Answer

    1.    样本保存不当或保存时间太长,导致基因组DNA降解。

    建议:组织样本保存于-20;尽量使用新近采集组织样本进行基因组DNA的提取。

    2.    组织样本用量过少,提取到的基因组DNA含量会较少。

    建议:有些植物样本含水量丰富,比如:水生植物如藻类等,可以适当增加其用量或将其稍微失水后再进行操作。

    3.    样本液氮研磨不彻底或者研磨完成后在室温放置时间过长。

    建议:液氮研磨一定要充分,尽量破碎样本细胞壁;研磨完成后立即将样本粉末转移至65预热的Buffer PL1中进行下一步操作。

    4.    没有使用正确的试剂盒。

    建议:使用专用的植物基因组DNA提取试剂盒(Plant DNA Isolation Kit)进行植物基因组DNA的提取纯化。

    5.    ForegeneProtease保存不当,导致其活性降低或失活。

    建议:确认Foregene Protease保存条件或者更换新的Foregene Protease进行酶解反应。

    6.    洗脱液问题

    建议:请使用Buffer EB进行洗脱;如果使用ddH2O或其他洗脱液,确认洗脱液的pH值在7.0-8.5之间。

    7.    洗脱液没有正确滴加

    建议:请将洗脱液滴加到硅胶膜的正中间,并在室温放置5分钟增加洗脱效率。

    8.    洗脱液体积太少

    建议:请按说明书上要求使用洗脱液进行基因组DNA洗脱,最少不要低于100μL


  • 提取获得基因组DNA纯度低

    Answer

    基因组DNA纯度低会导致下游实验的失败或效果差,如:酶切不开,PCR得不到目的基因片段等。

    1.    杂蛋白污染、RNA污染。

    分析:没有使用Buffer PW洗涤纯化柱;Buffer PW洗涤纯化柱没有使用正确的离心转速。

    建议:在上清液过柱时尽量保证上清液中无沉淀;务必按说明书进行Buffer PW洗涤纯化柱,并且此步骤不能省略。

    2.    杂质离子污染。

    分析:省略了Buffer WB洗涤纯化柱或者只洗涤了一次,导致残留的离子污染。

    建议:务必按说明书使用Buffer WB洗涤2次,以尽量去除残留的离子。

    3.    RNA酶污染。

    分析:Buffer中添加了外源的RNA酶;Buffer PW洗涤操作不正确,导致RNA酶残留,影响下游RNA实验操作,如:体外转录等。

    建议:Foregene系列核酸提取试剂盒无需额外添加RNA酶即可去除RNAPlant DNA Isolation Kit里面所有试剂均无需添加RNA酶;务必按说明书进行Buffer PW洗涤纯化柱,并且此步骤不能省略。

    4.    乙醇残留。

    分析:Buffer WB洗涤纯化柱后,没有进行空管离心操作。

    建议:按说明书进行正确的空管离心操作。

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COA