产 品 名 称 | 血液基因组DNA中量提取试剂盒(1-5mL) Blood DNA midi Kit |
货 号 | DE-05121 |
规 格 | 50T |
价 格 | ¥557.00 |
描 述 | 快速从抗凝全血样本中纯化获得高质量的基因组DNA，试剂盒包含Foregene纯化柱及试剂。 |
产品介绍
由于血液样本中含有大量的红细胞以及血小板细胞等，使得血液的处理比较麻烦，而一般方法提取到的血液基因组DNA纯度不高，含量太低。本试剂盒采用全新的Foregene Protease Plus以及独特的BL1、BL2缓冲体系，可以在短时间内完全消化抗凝血液和凝血样本，从而最大程度上避免了DNA的降解以及获得最大量的基因组DNA。快速的血液处理系统，简便的离心柱操作，大大简化了血液基因组的提取，使得40min内即可得到高质量、高纯度的基因组DNA。
本试剂盒离心柱采用的DNA-only硅胶膜为本公司特有新型材料，高效、特异吸附DNA，可最大限度的去除RNA、杂质蛋白、离子及细胞中其他有机化合物。获得的DNA片段大，纯度高、质量稳定可靠，一个离心柱的最大承载量为80 μg DNA。获得的DNA可用于酶切、PCR、Southern杂交、文库构建等分子生物学实验。
试剂盒应用
该试剂盒适用于新鲜或冻存的抗凝全血基因组DNA提取纯化。
纯化DNA的应用
血液基因组DNA去试剂盒 纯化获得的基因组DNA纯度高，可用于常规分子生物学操作，如：酶切、PCR、Southern杂交、文库构建等实验。
DNA提取得率和纯度
血液基因组DNA提取得率与组织的来源、保存条件、保存时间、用量等因素相关，所得基因组DNA纯度均满足常规分子生物学实验操作，其OD260/280在1.7-1.9之间。
试剂盒内容
Buffer DC：裂解血液中的红细胞。
Buffer BL1：提供样本酶解环境。
Foregene Protease Plus：在Buffer BL1的环境下酶解血液样本。
Buffer BL2：失活Foregene Protease Plus，并提供DNA上柱环境。
Buffer PW：去除DNA中的蛋白质、RNA等杂质。
Buffer WB1：去除DNA中的残留的盐离子。
Buffer EB：洗脱纯化柱膜上的DNA。
DNA-Only Column：特异吸附裂解产物中的基因组DNA。
产品信息
型号 | 离心柱型 | 纯化组件 | Foregene离心柱、试剂 |
通量 | 1-24个样品 | 制备时间 | 40-50 min (24个样品) |
离心机 | 台式离心机 | 样本酶解物分离 | 离心分离 |
离心柱液体盛装量 | 800 μL | 纯化柱DNA承载量 | 80 μg |
洗脱体积 | 100-200 μL | 血液样本处理量 | 1-5 mL |
操作流程
说明书
产品文献
MSDS
COA
提取过程中无法获得基因组DNA
Answer
1. 使用凝血组织提取DNA。
建议：提取血液基因组DNA，请采用新鲜血液或保存的抗凝血液(最好使用EDTA作为抗凝剂)。
2. 血液用量过少可能导致提取不到相应的基因组DNA。
建议：对于哺乳动物的血液，建议使用1000 μL以上抗凝血液血液；禽类等的血液建议采用50 μL以上抗凝血液。
3. ForegeneProtease Plus保存不当，导致其活性降低或失活。
建议：确认Foregene Protease Plus保存条件或者更换新的Foregene Protease Plus进行酶解反应。
4. 试剂盒保存不当或存放时间太长，导致试剂盒里面某些组分失效。
建议：购置新的Blood DNA Midi Kit提取试剂盒进行相关操作。
5. Buffer WB1没有添加无水乙醇。
建议：确认Buffer WB1中添加正确体积的无水乙醇。
6. 洗脱液没有正确滴加到硅胶膜上。
建议：将65℃预热的洗脱液滴加到硅胶膜的正中间，并在室温放置5分钟增加洗脱效率。
提取获得低产量基因组DNA
Answer
1. 血液保存不当或保存时间太长，导致基因组DNA降解。
建议：尽量使用新近采集血液进行基因组DNA的提取。
2. 样本用量过少，提取到的基因组DNA含量会较少。
建议：哺乳类动物的血液中含基因组DNA的细胞较少，若需更多的基因组DNA，建议使用1000μl以上的抗凝血进行基因组DNA提取。
3. 肝素抗凝血液没有进行Buffer DC处理。
建议：肝素本身会对DNA的提取有影响，在进行肝素抗凝血基因组DNA提取时，请务必按操作说明进行Buffer DC预处理。
4. ForegeneProtease Plus保存不当，导致其活性降低或失活。
建议：确认Foregene Protease Plus保存条件或者更换新的ForegeneProtease Plus进行酶解反应。
5. 洗脱液问题。
建议：请使用Buffer EB进行洗脱；如果使用ddH2O或其他洗脱液，确认洗脱液的pH值在7.0-8.5之间。
6. 洗脱液没有正确滴加。
建议：请将洗脱液滴加到硅胶膜的正中间，并在室温放置5分钟增加洗脱效率。
7. 洗脱液体积太少。
建议：请按说明书上要求使用洗脱液进行基因组DNA洗脱，最少不要低于100 μL。
提取获得基因组DNA纯度低
Answer
基因组DNA纯度低会导致下游实验的失败或效果不理想，如：酶切不开，PCR得不到目的基因片段等。
1. 杂蛋白污染、RNA污染。
分析：没有使用Buffer PW洗涤纯化柱；Buffer PW洗涤纯化柱没有使用正确的离心转速。
建议：在上清液过柱时尽量保证上清液中无沉淀；务必按说明书进行Buffer PW洗涤纯化柱，并且此步骤不能省略。
2. 杂质离子污染。
分析：省略了Buffer WB1洗涤纯化柱或者只洗涤了一次，导致残留的离子污染。
建议：务必按说明书使用Buffer WB1洗涤2次，以尽量去除残留的离子。
3. RNA酶污染。
分析：Buffer中添加了外源的RNA酶；BufferPW洗涤操作不正确，导致RNA酶残留，影响下游RNA实验操作，如：体外转录等。
建议：Foregene系列核酸提取试剂盒无需额外添加RNA酶即可去除RNA，Blood DNA Midi Kit里面所有试剂均无需添加RNA酶；务必按说明书进行Buffer PW洗涤纯化柱，并且此步骤不能省略。
4. 乙醇残留。
分析：Buffer WB1洗涤纯化柱后，没有进行空管离心操作。
建议：按说明书进行正确的空管离心操作。
